ForeDirect RT-qPCR Kit
Keterangan
ForeDirect RT-qPCR Kit dirancang untuk amplifikasi real-time langsung RNA dari koleksi swab tanpa proses pemurnian RNA.Kit ini menyelesaikan siklus qRT-PCR dalam waktu satu jam.Campuran enzim adalah campuran optimal dari Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Reaction Buffer berisi semua komponen yang diperlukan, termasuk komponen buffer yang dioptimalkan, Mg2+, dUTP, dan dNTP.
Spesifikasi
100T
Komponen kit
Agen pelepas asam nukleat |
pelindung RNA |
2× Penyangga RT-qPCR |
Campuran Enzim (Taq&M-MLV) |
Instruksi |
Aplikasi PCR
1. Setelah tabung reaksi PCR disentrifugasi sebentar, masukkan ke dalam tangki sampel instrumen amplifikasi.
2. Protokol termal
Melangkah | Suhu | Waktu | Siklus | |
1 | Membalikkan transkripsi | 50 ℃ | 15 menit | 1 |
2 | Pra-denaturasi | 95 ℃ | 1 mnt | 1 |
3 | Denaturasi | 95 ℃ | 10 detik | 42 |
4 | Anil / Perpanjangan | 60 ℃ | 30 detik |
Catatan:Sinyal neon terdeteksi segera setelah langkah perpanjangan setiap siklus.
3. Setelah pengaturan, simpan file dan jalankan program reaksi.
Langkah Operasi
Sebelum persiapan reagen, semua reagen dalam kit harus dicairkan pada suhu kamar dan dicampur dengan lembut.
Persiapan reagen
1. Siapkan Campuran Pelepas Asam Nukleat
Komponen | Volume per Sampel atau Kontrol |
Agen pelepas asam nukleat | 5μL |
pelindung RNA | 0,5μL |
2. Siapkan Campuran Reaksi
Komponen | Volume per Sampel atau Kontrol |
2× Penyangga RT-qPCR | 15 µL |
Campuran Enzim (Taq&M-MLV) | 1,5μL |
Primer dan Probe | 1μL |
Penyimpanan dan Umur simpan
- Kit harus disimpan pada -20± 5℃.Masa berlaku adalah 12 bulan.
-Hindari siklus beku-cair berulang (<5 siklus).