Kit RT-qPCR langsung
Keterangan Kit:
◮ Direct RT-qPCR Kit, menggunakan Foreasy Reverse Transcriptase dan Foreasy HS Taq DNA Polymerase yang dikembangkan oleh Foregene, dengan buffer reaksi yang unik, membuat kit ini memiliki ketahanan dan kompatibilitas yang kuat, dan dapat langsung menguji reaksi menggunakan sistem Foregene Lysis sebagai template.Kit ini dapat digunakan untuk kit deteksi asam nukleat COVID-19 dan pengembangan kit deteksi asam nukleat bakteri patogen lainnya.
Keterangan
Direct RT-qPCR Kit menyediakan buffer RT-qPCR yang dikemas secara terpisah dan enzim dengan efisiensi tinggicampuran (Taq 、 M-MLV 、 RI), membuatnya nyaman untuk pembuatan kit dan sistem back-endpenyesuaian, dalam verifikasi sederhana.
Spesifikasi
500T, 50.000T
Komponen kit
| Isi kit (sistem reaksi 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Campuran Enzim Langsung | 500μL×1 | 50 mL×1 |
| 2× Buffer RT-qPCR Langsung | 1 mL×5 | 500 mL×1 |
| Petunjuk | 1 | 1 |
Langkah Operasi
Sebelum persiapan reagen, semua reagen dalam kit harus dicairkan pada suhu kamar dan dicampur dengan lembut.
A: Mempersiapkan of templat Dan reagen
1. Siapkan template RNA yang sudah disiapkan (Disarankan untuk menggunakan kit seri Foregene Total RNA Isolation Kit untuk mengekstraksi dan memurnikan template RNA) atau sampel produk perengkahan (Disarankan untuk menggunakan sistem Foregene Lysis), primer spesifik (10 μM) dan bahan habis pakai lainnya yang relevan, instrumen.
2. Pasang 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O dan 20× ROX Reference Dye (jika's diperlukan) di dalam kotak dengan es, membuatnya meleleh secara alami, dan dicampur dengan lembut.
B: Mempersiapkan of RT-qPCR sistem
Meja 1 : Mempersiapkan of RT-qPCR ssistem
| Komponen | Volume | Konsentrasi akhir |
| 2× Buffer RT-qPCR Langsung | 10 µL | 1× |
| Campuran Enzim Langsung | 1μL | |
| Primer Maju (10 μM) | 0,8 µL | 50-900nM |
| Membalikkan Primer (10 μM) | 0,8 µL | 50-900nM |
| Penyelidikan (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Templat (RNA atau Lisat) | X µL | |
| Pewarna Referensi 20×ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) µL | |
| Jumlah Volume | 20μL |
C: Mengatur itu RT-qPCR reaksi program
Meja 2 : RT-qPCR reaksion program pengaturan (untuk contoh: dua-melangkah metode)
| Melangkah | Suhu | Waktu | Siklus | Isi | |
| 1 | 50 ℃ | 15 menit | 1* | 1 | Membalikkan transkripsi |
| 2 | 95 ℃ | 1 mnt | 1 | Pra-denaturasi | |
| 3 | 95 ℃ | 10 detik | 40-45 | Denaturasi | |
| 60 ℃ | 30 detik 2* | Anil / Perpanjangan | |||
Penyimpanan dan Umur simpan
- Kit harus disimpan pada -20± 5℃.Masa berlaku adalah 12 bulan.
-Hindari siklus beku-cair berulang (<5 siklus).
