Enzim Taq hot-start banyak digunakan.Dibandingkan dengan polimerase DNA biasa, enzim Taq hot-start dapat secara efektif menghindari beberapa amplifikasi non-spesifik dan pembentukan dimer primer, dan secara efektif dapat meningkatkan tingkat keberhasilan amplifikasi gen target.Terutama di bidang pengujian genetik, enzim Taq hot-start telah diidentifikasi sebagai standar wajib dalam industri, dan DNA polimerase biasa tidak boleh digunakan.Seperti dapat dilihat dari atas, enzim Taq mulai panas digunakan secara luas.Saat ini, terdapat banyak merek enzim Taq hot-start di pasar domestik, namun tidak banyak enzim Taq hot-start dengan kualitas tinggi.Menghadapi begitu banyak produk enzim Taq yang mulai panas, bagaimana kita harus memilih?

1. Pilih enzim Taq hot-start dengan efisiensi amplifikasi tinggi

Efisiensi amplifikasi PCR berkaitan erat dengan kinerja enzim Taq.Setelah sistem reaksi enzim Taq yang baik dioptimalkan, efisiensi amplifikasi di atas 95%, dan rentang amplifikasi dari jumlah templat awal lebar.Amplifikasi yang memuaskan dapat diperoleh ketika kandungan gen target rendah, dan tidak mudah diracuni ketika jumlah templat tinggi, dan periode amplifikasi eksponensial panjang.Untuk enzim Taq dengan kinerja buruk, bahkan jika sistem reaksi telah dioptimalkan berkali-kali, efisiensi amplifikasi masih kurang dari 90%, bentuk kurva amplifikasi "S" tidak jelas, kemiringannya kecil, dan kurva datar.Ketika jumlah template rendah, itu tidak dapat diamplifikasi, dan ketika jumlah template tinggi, efek amplifikasi tidak ideal.Oleh karena itu, pemilihan polimerase DNA dengan efisiensi amplifikasi tinggi sangat penting untuk keberhasilan PCR dan qPCR.

2. Pilih enzim Taq hot-start dengan kekuatan enzim yang kuat

Kekuatan enzimatik enzim Taq terkait dengan efisiensi amplifikasi.Secara umum, semakin kuat kekuatan enzim dari enzim Taq hot-start, semakin lama periode pertumbuhan eksponensial amplifikasi PCR, kurva 'berbentuk S' yang lebih khas, semakin tinggi nilai sinyal fluoresensi, dan lebih cocok untuk deteksi PCR multipleks.Polimerase DNA merek dengan kekuatan enzimatik yang lemah umumnya hanya dapat mendukung reaksi 2-plex.Saat melakukan reaksi 3-plex, kurva amplifikasi rendah, nilai sinyal fluoresensi rendah, dan tidak ada kurva amplifikasi tipikal, sehingga hasilnya sulit untuk dinilai.

3. Pilih enzim Taq hot-start dengan sensitivitas tinggi

Secara umum, DNA polimerase memiliki efisiensi amplifikasi yang tinggi dan sensitivitas yang tinggi, tetapi terdapat juga ketidakkonsistenan.Jika kelimpahan gen target sampel yang akan diamplifikasi rendah, disarankan untuk menguji sensitivitas amplifikasi enzim Taq.Metode deteksi yang paling umum adalah melakukan pengenceran gradien 10 kali lipat atau 5 kali lipat dari fragmen gen plasmid target, melakukan deteksi PCR pada pengenceran yang lebih rendah, dan memilih enzim Taq mulai panas dengan sensitivitas deteksi yang lebih tinggi.

Dapat dilihat dari penjelasan di atas bahwa peneliti perlu memilih sesuai dengan kebutuhan eksperimen dan kondisi pendanaan mereka sendiri.Yang terbaik adalah melakukan percobaan amplifikasi pengenceran gradien untuk mendeteksi efisiensi amplifikasi dan sensitivitas enzim Taq hot-start.

Contoh Foregene's Taq DNA Polimerase:

Foreasy HS Taq DNA Polimerase

Keterangan

Foreasy HS Taq DNA Polymerase adalah polimerase DNA yang diekspresikan dalam bakteri rekayasa Escherichia coli dengan teknologi rekombinasi gen.Enzim dikombinasikan dengan buffffer reaksi unik, yang membuat produk sangat tahan dan kompatibel, dan dapat langsung menggunakan sampel lisat (Foregene Lysis system) sebagai template untuk reaksi deteksi.

Aplikasi

PCR kualitatif dan deteksi PCR kuantitatif dari templat yang dimurnikan dan templat yang tidak dimurnikan.

Kontrol kualitas

1.Tidak ada aktivitas nuclease eksogen yang terdeteksi

2.Metode PCR untuk mendeteksi sisa DNA genomik tanpa inang

3. Secara efektif dapat memperkuat gen salinan tunggal dalam Genom manusia

4.Simpan pada suhu kamar selama seminggu, tidak ada perubahan aktivitas yang jelas

Detail produk: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/