• facebook
  • linkedin
  • Youtube

1:Ganti persediaan eksperimental tepat waktu

berita812 (1) 

Atur kontrol negatif (NTC) dan ulangi berkali-kali.Setelah ditemukan adanya kontaminasi produk PCR di laboratorium, ganti semua bahan percobaan tepat waktu.Seperti: mengencerkan kembali dan menyiapkan primer, mensterilkan ulang ujung pipet, tabung EP, ddH2O, dll., mengganti dengan pipet baru, dan meminjam sementara laboratorium lain untuk melakukan percobaan PCR.Laboratorium yang terkontaminasi harus diberi ventilasi dan disinari dengan sinar ultraviolet sampai kontaminasi produk PCR dihilangkan sebelum melanjutkan eksperimen.

2: Perpanjang waktu paparan UV

berita812 (2)

Perlu dicatat bahwa untuk menghilangkan kontaminasi DNA, radiasi ultraviolet biasa harus diperpanjang 2 jam dari biasanya.Meski begitu, efek penyinaran UV terhadap penghilangan fragmen kecil (di bawah 200bp) kontaminasi DNA masih kurang baik.

Panjang gelombang ultraviolet (nm) umumnya 254/300nm, dan cukup untuk menyinari selama 30 menit.Perlu dicatat bahwa ketika memilih UV untuk menghilangkan kontaminasi sisa produk PCR, panjang produk PCR dan distribusi basa dalam urutan produk harus dipertimbangkan.Iradiasi UV hanya efektif untuk fragmen panjang di atas 500 bp, dan pengaruhnya kecil pada fragmen pendek.

Selama penyinaran UV, basa pirimidin pada produk PCR akan membentuk dimer.Dimer ini dapat menghentikan ekstensi, tetapi tidak semua pirimidin dalam rantai DNA dapat membentuk dimer, dan penyinaran UV juga dapat merusak dimer..Tingkat pembentukan dimer tergantung pada panjang gelombang UV, jenis dimer pirimidin dan urutan nukleotida yang berdekatan dengan situs dimer.Oleh karena itu, jika fragmen yang diamplifikasi PCR berukuran kecil, disarankan untuk menggunakan sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG.

3:Pemulung polusi DNA yang umum digunakan

berita812 (3)

Aerosol mudah dihasilkan saat ditambahkan pipet, yang sulit dihindari, dan akan mengendap dengan cepat.Oleh karena itu, tidak diragukan lagi merupakan pilihan yang baik untuk sering menggunakan pemulung polusi DNA khusus untuk mencegah penyebaran polusi DNA.

4:Gunakan sistem anti polusi UNG

berita812 (4)

Setelah kontaminasi produk PCR dihilangkan, laboratorium penguji dapat menggunakan sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG untuk mencegah kontaminasi produk PCR.Di laboratorium umum, Anda dapat melakukan partisi eksperimental sederhana, memisahkan secara ketat area produk PCR dari area lain, menetapkan aturan dan regulasi laboratorium tertentu, serta melakukan pelatihan yang relevan untuk mencegah terjadinya kontaminasi produk PCR.

Rekomendasi: Mendirikan laboratorium PCR yang wajar, memelihara lingkungan PCR yang baik, merumuskan prosedur operasi PCR standar, dan menumbuhkan kesadaran pengoperasian yang ketat dari para peneliti adalah kunci untuk mencegah atau mengurangi polusi eksperimen PCR.


Waktu posting: 12 Agustus-2021