Antibodi, juga disebut imunoglobulin (Ig), adalah glikoprotein yang secara spesifik berikatan dengan antigen.
 
Persiapan antibodi konvensional diproduksi dengan mengimunisasi hewan dan mengumpulkan antiserum.Oleh karena itu, antiserum biasanya mengandung antibodi terhadap antigen lain yang tidak terkait dan komponen protein lain di dalam serum.Molekul antigen umum kebanyakan mengandung banyak epitop berbeda, jadi antibodi konvensional juga merupakan campuran antibodi terhadap banyak epitop berbeda.Bahkan antibodi serum konvensional yang ditujukan terhadap epitop yang sama masih terdiri dari antibodi heterogen yang diproduksi oleh klon sel B yang berbeda.Oleh karena itu, antibodi serum konvensional juga disebut antibodi poliklonal, atau singkatnya antibodi poliklonal.
 
Antibodi monoklonal (antibodi monoklonal) adalah antibodi yang sangat seragam yang diproduksi oleh klon sel B tunggal dan hanya ditujukan terhadap epitop tertentu.Biasanya disiapkan dengan teknologi hibridoma — teknologi antibodi hibridoma didasarkan pada teknologi fusi sel, menggabungkan sel B dengan kemampuan untuk mengeluarkan antibodi spesifik dan sel myeloma dengan kapasitas pertumbuhan tak terbatas menjadi hibridoma sel B .Sel hibridoma ini memiliki ciri sel induk.Ini dapat berkembang biak tanpa batas dan abadi secara in vitro seperti sel myeloma, dan dapat mensintesis dan mengeluarkan antibodi spesifik seperti limfosit limpa.Melalui kloning, garis monoklonal yang berasal dari satu sel hibridoma, yaitu garis sel hibridoma, dapat diperoleh.Antibodi yang dihasilkannya adalah antibodi yang sangat homogen terhadap determinan antigenik yang sama, yaitu antibodi monoklonal.
 
Antibodi ada sebagai satu atau lebih monomer berbentuk Y (yaitu, antibodi monoklonal atau antibodi poliklonal).Setiap monomer berbentuk Y terdiri dari 4 rantai polipeptida, termasuk dua rantai berat identik dan dua rantai ringan identik.Rantai ringan dan rantai berat diberi nama sesuai dengan berat molekulnya.Bagian atas struktur berbentuk Y adalah wilayah variabel, yang merupakan tempat pengikatan antigen.(Kutipan dari Konsep Antibodi Bio-Monoklonal Detai)
 
Struktur antibodi
Rantai berat
Ada lima jenis rantai berat Ig mamalia, dinamai dengan huruf Yunani α, δ, ε, γ, dan μ.Antibodi yang sesuai disebut IgA, IgD, IgE, IgG, dan IgM.Rantai berat yang berbeda berbeda dalam ukuran dan komposisi.α dan γ mengandung sekitar 450 asam amino, sedangkan μ dan ε mengandung sekitar 550 asam amino.
Setiap rantai berat memiliki dua wilayah: wilayah konstan dan wilayah variabel.Semua antibodi dari jenis yang sama memiliki wilayah konstan yang sama, tetapi ada perbedaan antara antibodi dari jenis yang berbeda.Daerah konstan rantai berat γ, α, dan δ terdiri dari tiga domain Ig secara bersamaan, dengan daerah engsel untuk meningkatkan fleksibilitasnya;daerah konstan rantai berat μ dan ε terdiri dari 4 domain Ig.Wilayah variabel dari rantai berat antibodi yang dihasilkan oleh sel B berbeda berbeda, tetapi wilayah variabel antibodi yang dihasilkan oleh sel B atau klon sel yang sama adalah sama, dan wilayah variabel dari setiap rantai berat panjangnya sekitar 110 asam amino., Dan membentuk satu domain Ig.
 
Rantai ringan
Hanya ada dua jenis rantai ringan pada mamalia: jenis lambda dan jenis kappa.Setiap rantai ringan memiliki dua domain yang terhubung: wilayah konstan dan wilayah variabel.Panjang rantai ringan adalah sekitar 211~217 asam amino.Dua rantai ringan yang terkandung dalam setiap antibodi selalu sama.Untuk mamalia, rantai ringan di setiap antibodi hanya memiliki satu jenis: kappa atau lambda.Pada beberapa vertebrata yang lebih rendah, seperti ikan bertulang rawan (ikan bertulang rawan) dan ikan bertulang, jenis rantai ringan lainnya seperti jenis iota (iota) juga ditemukan.
 
segmen Fab dan Fc
Segmen Fc dapat langsung digabungkan dengan enzim atau pewarna fluoresen untuk melabeli antibodi.Ini adalah bagian di mana antibodi terpaku pada pelat selama proses ELISA, dan juga merupakan bagian di mana antibodi kedua dikenali dan diikat dalam imunopresipitasi, imunoblotting, dan imunohistokimia.Antibodi dapat dihidrolisis menjadi dua segmen F(ab) dan satu segmen Fc oleh enzim proteolitik seperti papain, atau dapat dipecah dari daerah engsel oleh pepsin dan dihidrolisis menjadi satu segmen F(ab)2 dan satu segmen Fc.Fragmen antibodi IgG terkadang sangat berguna.Karena kurangnya segmen Fc, segmen F(ab) tidak akan mengendap dengan antigen, juga tidak akan ditangkap oleh sel imun dalam studi in vivo.Karena fragmen molekul kecil dan kurangnya fungsi ikatan silang (karena kurangnya segmen Fc), segmen Fab biasanya digunakan untuk radiolabeling dalam studi fungsional, dan segmen Fc terutama digunakan sebagai agen penghambat dalam pewarnaan histokimia.
 
Daerah variabel dan konstan
Wilayah variabel (wilayah V) terletak di 1/5 atau 1/4 (mengandung sekitar 118 residu asam amino) dari rantai H dekat terminal-N dan 1/2 (mengandung sekitar 108-111 residu asam amino) di dekat terminal-N rantai L .Setiap wilayah V memiliki cincin peptida yang dibentuk oleh ikatan disulfida intra-rantai, dan setiap cincin peptida mengandung sekitar 67 hingga 75 residu asam amino.Komposisi dan susunan asam amino di wilayah V menentukan spesifisitas pengikatan antigen dari antibodi.Karena jenis dan urutan asam amino yang selalu berubah di wilayah V, banyak jenis antibodi dengan spesifisitas antigen pengikat yang berbeda dapat dibentuk.Daerah V dari rantai L dan rantai H masing-masing disebut VL dan VH.Pada VL dan VH, komposisi dan urutan asam amino beberapa daerah lokal memiliki tingkat variasi yang lebih tinggi.Wilayah ini disebut wilayah hipervariabel (HVR).Komposisi dan susunan asam amino bagian non-HVR di wilayah V relatif konservatif, yang disebut wilayah kerangka.Ada tiga daerah hipervariabel di VL, biasanya terletak di residu asam amino masing-masing 24 sampai 34 dan 89 sampai 97.Tiga HVR dari VL dan VH masing-masing disebut HVR1, HVR2 dan HVR3.Penelitian dan analisis difraksi kristal sinar-X membuktikan bahwa daerah hipervariabel memang merupakan tempat pengikatan antigen antibodi, sehingga disebut daerah penentu komplementaritas (CDR).HVR1, HVR2 dan HVR3 dari VL dan VH masing-masing dapat disebut CDR1, CDR2 dan CDR3.Secara umum, CDR3 memiliki tingkat hipervariabilitas yang lebih tinggi.Wilayah hipervariabel juga merupakan lokasi utama di mana penentu idiotipik molekul Ig ada.Dalam kebanyakan kasus, rantai H memainkan peran yang lebih penting dalam mengikat antigen.
Wilayah konstan (wilayah C)terletak di 3/4 atau 4/5 (kira-kira dari asam amino 119 ke terminal C) rantai H di dekat terminal C dan 1/2 (mengandung sekitar 105 residu asam amino) di dekat terminal C rantai L.Setiap wilayah fungsional rantai H mengandung sekitar 110 residu asam amino, dan mengandung cincin peptida yang terdiri dari 50-60 residu asam amino yang dihubungkan oleh ikatan disulfida.Komposisi asam amino dan susunan daerah ini relatif konstan pada rantai Ig isotipe L hewan yang sama dan rantai tipe H yang sama.Sama, ia hanya dapat secara spesifik mengikat antigen yang sesuai, tetapi struktur wilayah C-nya sama, yaitu memiliki antigenisitas yang sama.Antibodi sekunder IgG anti-manusia kuda (atau anti-antibodi) dapat dikombinasikan dengan dua kombinasi antibodi (IgG) terhadap eksotoksin yang berbeda terjadi.Ini adalah dasar penting untuk menyiapkan antibodi sekunder dan menerapkan fluorescein, isotop, enzim, dan antibodi berlabel lainnya.
 
 
Produk-produk terkait:
Kit RT-qPCR Sel Langsung