-
Metode optimisasi sistem reaksi eksperimental RT-PCR ringkasan terperinci
一、Meningkatkan sensitivitas sistem reaksi： 1. Isolasi RNA berkualitas tinggi： Sintesis cDNA yang sukses berasal dari RNA berkualitas tinggi.RNA berkualitas tinggi setidaknya harus panjang penuh dan bebas dari penghambat transkriptase balik seperti EDTA atau SDS.Kualitas RNA menentukan maksimum ...Baca selengkapnya -
Desain primer PCR lengkap dan detail PCR
Dasar desain primer (99% masalah dapat diselesaikan) 1. Panjang primer: Buku teks membutuhkan 15-30bp, biasanya sekitar 20bp.Kondisi sebenarnya lebih baik menjadi 18-24bp untuk memastikan spesifisitas, tetapi semakin lama semakin baik, primer yang terlalu lama juga akan menurunkan spesifisitas, dan menurunkan rendemen.2. Prim...Baca selengkapnya -
Tindakan pencegahan untuk qRT-PCR disusun oleh Dokter senior dengan susah payah
Semua orang berbicara tentang prinsip eksperimen qRT-PCR, desain primer, interpretasi hasil, dll., tetapi saya pikir saya harus berbagi dengan Anda operasi eksperimental qRT-PCR.Ini kecil, tapi ini tentang hasil.Sebelum melakukan qRT-PCR, kita harus memiliki pemahaman yang jelas tentang ...Baca selengkapnya -
Tindakan pencegahan untuk RT-qPCR
Eksperimen RT-qPCR meliputi ekstraksi RNA dan penilaian kualitas, transkripsi balik dan qPCR tiga langkah, setiap langkah memiliki banyak tindakan pencegahan, kami akan memperkenalkan secara rinci di bawah ini.Ⅰ.Penilaian kualitas RNA Dalam percobaan RT-qPCR, setelah ekstraksi RNA selesai, ...Baca selengkapnya -
Pengantar menyeluruh untuk PCR waktu nyata
1. Pemahaman awal Pada tahap ini kita perlu memahami beberapa konsep dan terminologi, agar tidak terjadi kesalahan di depan senior kita, seperti: Q: Apa bedanya RT-PCR, qPCR, Real-time PCR, dan RT-PCR waktu nyata?Jawab: RT-PCR adalah reverse transcription PCR (reverse t...Baca selengkapnya -
PCR, PCR ganda, PCR in situ, PCR terbalik, RT-PCR, qPCR（1）– PCR
PCR, multiple PCR, In situ PCR, Reverse PCR, RT-PCR, qPCR（1）– PCR Kami akan memilah konsep, langkah, dan detail berbagai PCR Ⅰ.Reaksi Rantai Polimerase PCR, disebut sebagai PCR, adalah teknologi biologi molekuler yang digunakan untuk memperbesar fragmen DNA tertentu.Itu bisa dianggap sebagai ...Baca selengkapnya -
prinsip eksperimental qRT-PCR
RT-qPCR dikembangkan dari teknologi PCR biasa.Ini menambahkan bahan kimia fluoresen (pewarna fluoresen atau probe fluoresen) ke sistem reaksi PCR tradisional, dan mendeteksi proses anil dan perpanjangan PCR secara real time sesuai dengan mekanisme pendaran yang berbeda.Tanda neon...Baca selengkapnya -
Metode optimisasi sistem reaksi eksperimental RT-PCR ringkasan terperinci
Ⅰ.Tingkatkan sensitivitas sistem reaksi: 1. Pisahkan RNA berkualitas tinggi: Sintesis cDNA yang berhasil berasal dari RNA berkualitas tinggi.RNA berkualitas tinggi harus memastikan setidaknya total lebih lama dan tidak mengandung inhibitor yang tidak mengandung enzim perekam, seperti EDTA atau SDS.Kualitas ...Baca selengkapnya -
Bagaimana Memastikan Rentang Nilai Ct Yang Wajar Untuk Eksperimen qPCR
Nilai Ct adalah bentuk presentasi hasil yang paling penting dari PCR kuantitatif fluoresen.Ini digunakan untuk menghitung perbedaan ekspresi gen atau nomor salinan gen.Jadi berapa nilai Ct dari kuantifikasi fluoresensi yang dianggap masuk akal?Bagaimana cara memastikan rentang nilai Ct yang efektif?Apa itu Ct...Baca selengkapnya -
Perhatikan detail berikut untuk menggandakan tingkat keberhasilan percobaan RT-qPCR Anda!
RT-qPCR adalah eksperimen dasar biologi molekuler, dan semua orang pasti sudah familiar dengannya.Ini terutama mencakup tiga langkah: ekstraksi RNA, transkripsi balik menjadi cDNA, dan PCR kuantitatif fluoresen waktu-nyata.Itu tidak membantu, apa yang terjadi?Kemungkinan ada masalah d...Baca selengkapnya -
Ekstraksi RNA, 260/230 sangat rendah, dan nilai ct dari pcr run sangat tinggi.Bagaimana mengatasinya?
Rasio A260/A230 yang rendah biasanya disebabkan oleh pengotor dengan panjang gelombang serapan maksimum pada 230nm.Mari kita lihat apa saja pengotor ini: Polutan umum Panjang gelombang penyerapan Efek rasio Protein ~230nm dan 280nm Pengurangan simultan A 260 /A 280 dan A 260 /A ...Baca selengkapnya -
PCR kuantitatif fluoresen (qPCR) – desain primer
Dalam percobaan qPCR, desain primer juga merupakan tautan yang sangat penting.Apakah primer cocok atau tidak terkait erat dengan apakah efisiensi amplifikasi mencapai standar, apakah produk yang diamplifikasi spesifik, dan apakah hasil eksperimen tersedia.Lalu bagaimana cara membuat...Baca selengkapnya
-
Telepon
-
Surel
-
ada apa
ada apa
-
Atas