Kit Isolasi RNA Viral untuk Pemurnian RNA Viral dari Plasma, Serum, dan Sampel Lainnya
Keterangan Kit:
Cat.No.RE-02011/02014
Untuk pemurnian RNA virus dari plasma, serum, cairan tubuh bebas sel, supernatan kultur sel.
Dengan cepat mengisolasi dan memurnikan RNA virus dari sampel seperti plasma, serum, cairan tubuh bebas sel, dan supernatan kultur sel.
-Tidak perlu khawatir tentang degradasi RNA.Seluruh kit bebas RNase
-Sederhana—semua operasi diselesaikan pada suhu kamar
-Cepat—operasi dapat diselesaikan dalam 20 menit
-Hasil RNA tinggi: Kolom khusus RNA dan formula unik dapat memurnikan RNA secara efisien
-Aman—tidak menggunakan reagen organik
-Kapasitas pemrosesan sampel yang besar—hingga 200μl sampel dapat diproses setiap saat.
-Kualitas tinggi — RNA yang dimurnikan sangat murni, bebas dari protein dan kotoran lainnya, dan dapat memenuhi berbagai aplikasi eksperimental hilir.
Deskripsi
Kit ini menggunakan spin column dan formula yang dikembangkan oleh Foregene, yang secara efisien dapat mengekstrak RNA virus dengan kemurnian tinggi dan berkualitas tinggi dari sampel seperti plasma, serum, cairan tubuh bebas sel, dan supernatan kultur sel.Kit tersebut secara khusus menambahkan Linear Acrylamide, yang dapat dengan mudah menangkap sejumlah kecil RNA dari sampel.Kolom Khusus RNA dapat mengikat RNA secara efisien.Kit ini dapat memproses sampel dalam jumlah besar secara bersamaan.
Seluruh kit tidak mengandung RNase, sehingga RNA yang dimurnikan tidak akan terdegradasi.Buffer viRW1 dan Buffer viRW2 dapat memastikan bahwa asam nukleat virus yang diperoleh bebas dari protein, nuclease atau pengotor lainnya, yang dapat digunakan langsung untuk percobaan biologi molekuler hilir.
Spesifikasi
50 Persiapan, 200 Persiapan
Komponen kit
| Akrilamida Linier |
| ViRL penyangga |
| Penyangga viRW1, Penyangga viRW2 |
| ddH bebas RNase2O |
| Kolom Hanya RNA |
| Instruksi |
Fitur & keuntungan
-Tidak perlu khawatir tentang degradasi RNA.Seluruh kit bebas RNase
-Sederhana—semua operasi diselesaikan pada suhu kamar
-Cepat—operasi dapat diselesaikan dalam 20 menit
-Hasil RNA tinggi: Kolom khusus RNA dan formula unik dapat memurnikan RNA secara efisien
-Aman—tidak menggunakan reagen organik
-Kapasitas pemrosesan sampel yang besar—hingga 200μl sampel dapat diproses setiap saat.
-Kualitas tinggi — RNA yang dimurnikan sangat murni, bebas dari protein dan kotoran lainnya, dan dapat memenuhi berbagai aplikasi eksperimental hilir.
Parameter kit
Aplikasi kit:
Sangat cocok untuk ekstraksi dan pemurnian RNA virus dalam sampel seperti plasma, serum, cairan tubuh bebas sel dan supernatan kultur sel.
Aliran kerja
Kondisi penyimpanan
- Kit dapat disimpan selama 24 bulan pada suhu kamar (15-25 ℃), atau 2-8 ℃ untuk waktu yang lebih lama.
-Linear Acrylamide solusi dapat disimpan pada suhu kamar selama 7 hari.Setelah menerima kit, harap keluarkan larutan Linear Acrylamide dan simpan pada suhu -20 ℃.
-Setelah menambahkan Linear Acrylamide ke Buffer viRL, dapat disimpan pada 2-8℃ hingga 48 jam.Silakan gunakan solusi yang baru disiapkan.
Panduan untuk analisis masalah
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Tidak ada RNA yang dapat diekstraksi atau hasil asam nukleat rendah
Biasanya ada banyak faktor yang mempengaruhi efisiensi pemulihan, seperti: konten RNA sampel, metode operasi, volume elusi, dll.。
Analisis penyebab umum：
1.Penangas es atau sentrifugasi suhu rendah (4 ° C) selama pengoperasian.
Saran: Suhu kamar (15-25 ° C) operasi, tidak pernah mandi es dan centrifuge suhu rendah.
2. Penyimpanan sampel yang tidak tepat atau penyimpanan sampel yang terlalu lama.
Saran: Simpan sampel pada suhu -80 °C atau bekukan dalam nitrogen cair, dan hindari penggunaan freeze-thaw berulang;coba gunakan sampel yang baru dikumpulkan untuk ekstraksi RNA.
3. Sampel lisis tidak mencukupi
Rekomendasi: Harap pastikan bahwa sampel dan larutan kerja (Linear Acrylamide) telah tercampur rata dan diinkubasi selama 10 menit pada suhu kamar (15-25 ° C)
4.Eluen ditambahkan secara tidak benar
Rekomendasi: Pastikan ddH2O Bebas RNase ditambahkan ke tengah membran kolom pemurnian
5. Volume etanol anhidrat yang tidak tepat dalam Buffer viRW2
Saran: Silakan ikuti petunjuknya, tambahkan volume etanol anhidrat yang benar ke Buffer viRW2 dan campur dengan baik sebelum menggunakan kit。
6. Penggunaan sampel yang tidak tepat.
Saran: 200μl sampel per 500μl Buffer viRL.Volume sampel yang berlebihan akan menghasilkan tingkat ekstraksi RNA yang berkurang.
7. Volume elusi tidak tepat atau elusi tidak lengkap.
Saran: Volume eluen kolom pemurnian adalah 30-50μl;jika efek elusi tidak memuaskan, disarankan untuk menambahkan ddH Bebas RNase yang telah dipanaskan sebelumnya2O dan perpanjang waktu dengan menempatkan pada suhu kamar, seperti 5-10 menit
8.Kolom pemurnian memiliki residu etanol setelah dibilas dalam Buffer viRW2.
Saran: Jika etanol masih tersisa setelah pembilasan dalam Buffer viRW2 dan sentrifugasi tabung kosong selama 2 menit, kolom pemurnian dapat dibiarkan pada suhu kamar selama 5 menit setelah sentrifugasi tabung kosong untuk sepenuhnya menghilangkan sisa etanol.
Degradasi molekul RNA murni
Kualitas RNA yang dimurnikan terkait dengan faktor-faktor seperti penyimpanan sampel, kontaminasi RNase, dan pengoperasian.
Analisis penyebab umum：
1. Sampel yang dikumpulkan tidak disimpan tepat waktu.
Saran: Jika sampel tidak digunakan tepat waktu setelah pengumpulan, harap segera simpan pada suhu -80 ℃ atau nitrogen cair.Untuk ekstraksi molekul RNA, coba gunakan sampel yang baru dikumpulkan jika memungkinkan.
2. Sampel yang dikumpulkan dibekukan dan dicairkan berulang kali.
Saran: Hindari pembekuan dan pencairan berulang (tidak lebih dari satu kali) selama pengumpulan dan penyimpanan sampel, jika tidak maka rendemen asam nukleat akan menurun.
3.RNase diperkenalkan di ruang operasi atau tidak ada sarung tangan sekali pakai, masker, dll.
Saran: Percobaan ekstraksi molekul RNA sebaiknya dilakukan di ruang operasi RNA yang terpisah, dan meja percobaan dibersihkan sebelum percobaan.Kenakan sarung tangan dan masker sekali pakai selama percobaan untuk menghindari degradasi RNA yang disebabkan oleh pengenalan RNase.
4. Reagen terkontaminasi oleh RNase selama penggunaan.
Saran: Ganti dengan Viral RNA Isolation Kit baru untuk eksperimen terkait.
5. Kontaminasi RNase pada tabung sentrifus, ujung pipet, dll. Saran: Pastikan tabung sentrifus, ujung pipet, dan ujung pipet semuanya Bebas RNase.
Molekul RNA yang dimurnikan memengaruhi eksperimen hilir
Molekul RNA yang dimurnikan oleh kolom pemurnian akan memengaruhi eksperimen hilir jika terlalu banyak ion garam atau protein, seperti: transkripsi terbalik, Noda Utara, dll.。
1.Ada sisa ion garam dalam molekul RNA yang dielusi.
Rekomendasi: Pastikan volume yang tepat dari etanol anhidrat telah ditambahkan ke Buffer viRW2, dan cuci kolom pemurnian dua kali sesuai dengan kecepatan sentrifugasi yang benar pada instruksi pengoperasian;Jika masih ada ion garam yang tersisa, Anda dapat menambahkan Buffer viRW2 ke kolom pemurnian, dan biarkan pada suhu kamar selama 5 menit.Kemudian lakukan sentrifugasi untuk menghilangkan kontaminasi ion garam secara maksimal
2. Ada sisa etanol dalam molekul RNA yang dielusi
Saran: setelah memastikan bahwa kolom pemurnian telah dibilas dengan Buffer viRW2, lakukan sentrifugasi tabung kosong sesuai dengan kecepatan sentrifugal pada instruksi pengoperasian.Jika masih ada etanol yang tersisa, dapat dibiarkan selama 5 menit pada suhu kamar setelah sentrifugasi tabung kosong untuk menghilangkan sisa etanol secara maksimal.
Instruksi Manual:
Manual Instruksi Kit Isolasi RNA Virus
