Kit Isolasi DNA Tumbuhan Kit Pemurnian DNA Tanaman Genom Protokol Reagen
Spesifikasi
50 Persiapan, 100 Persiapan, 250 Persiapan
Kit ini menggunakan kolom khusus DNA yang secara khusus dapat mengikat DNA, Foregene protease, dan sistem penyangga unik, yang sangat menyederhanakan pemurnian DNA genom tanaman.DNA genom berkualitas tinggi dapat diperoleh dalam waktu 30 menit, yang menghindari degradasi DNA genom.
Membran gel silika khusus DNA yang digunakan dalam kolom spin adalah bahan baru Foregene yang unik, yang dapat mengikat DNA secara efektif dan spesifik, dan memaksimalkan penghilangan RNA, protein pengotor, ion, polisakarida, polifenol, dan senyawa organik lainnya.
Komponen produk
Penyangga PL1, Penyangga PL2 |
Penyangga PW, Penyangga WB, Penyangga EB |
Foregene Protease |
Kolom Khusus DNA |
Instruksi |
Fitur & keuntungan
■ Tidak ada kontaminasi RNase: Kolom Khusus DNA yang disediakan oleh kit memungkinkan untuk menghilangkan RNA dari DNA genom tanpa RNase tambahan selama percobaan, mencegah laboratorium terkontaminasi oleh RNase eksogen.
■ Kecepatan cepat: Foregene Protease memiliki aktivitas lebih tinggi daripada protease serupa dan mencerna sampel jaringan lebih cepat.
■ Sederhana: operasi ekstraksi DNA genom dapat diselesaikan dalam 30 menit.
■ Nyaman: Sentrifugasi dilakukan pada suhu kamar, tidak diperlukan sentrifugasi suhu rendah 4℃ atau presipitasi etanol DNA.
■ Keamanan: tidak diperlukan reagen organik.
■ Kualitas tinggi: DNA genom yang dimurnikan memiliki fragmen besar, tanpa RNA, tanpa RNase, dan kandungan ion yang sangat rendah, dapat memenuhi persyaratan berbagai percobaan.
Aplikasi kit
Cocok untuk ekstraksi dan pemurnian DNA genom dari jaringan tanaman segar atau beku.
Aliran kerja
Diagram
Penyimpanan dan Umur simpan
Kit dapat disimpan selama 12 bulan pada suhu kamar (15–25 ℃) dan 2–8℃ untuk waktu yang lebih lama.
Larutan Foregene Protease Plus memiliki formula unik, yaitu aktif bila disimpan pada suhu ruang dalam waktu lama (3 bulan);aktivitas dan stabilitasnya akan lebih baik bila disimpan di4℃, jadi disarankan untuk menyimpannya di suhu 4℃, ingat jangan simpan di suhu -20℃.
Panduan Analisis Masalah
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Hasil rendah atau tidak ada DNA
Biasanya ada banyak faktor yang mempengaruhi hasil DNA genom, termasuk sumber sampel, umur sampel, kondisi penyimpanan sampel, dan pengoperasian.
DNA genom tidak dapat diperoleh selama ekstraksi
1. Sampel jaringan tidak disimpan dengan benar atau disimpan terlalu lama, mengakibatkan degradasi DNA genomik.
Rekomendasi: Simpan sampel jaringan dalam nitrogen cair atau -20°C;coba gunakan sampel yang baru dikumpulkan untuk ekstraksi DNA genomik.
2. Jumlah sampel yang terlalu sedikit dapat menyebabkan DNA genom yang sesuai tidak dapat diekstraksi.
Saran: Untuk sampel jaringan yang telah disimpan dalam waktu lama atau mengalami degradasi DNA genom yang parah, jumlah sampel jaringan dapat ditingkatkan secara tepat untuk mengekstraksi DNA genom yang cukup banyak.Jumlah sampel dapat ditentukan sesuai dengan kebutuhan DNA, tetapi sampel segar tidak boleh melebihi 100mg, dan sampel kering tidak boleh melebihi 30mg.
3. Sampel tidak dihaluskan dengan nitrogen cair atau ditempatkan terlalu lama setelah nitrogen cair.
Saran: Selama ekstraksi DNA, sampel perlu digiling sepenuhnya dengan nitrogen cair untuk memecahkan dinding sel;setelah digiling, harap pindahkan bubuk sampel ke PL1 yang telah dipanaskan sebelumnya pada suhu 65°C sesegera mungkin (setelah bubuk bubuk meleleh, DNA genomik akan mulai terdegradasi dengan cepat) .
4. Penyimpanan Foregene Protease yang tidak tepat menyebabkan aktivitas berkurang atau tidak aktif.
Rekomendasi: Pastikan kondisi penyimpanan Foregene Protease atau ganti dengan Foregene Protease baru untuk hidrolisis enzimatik.
5. Kit tidak disimpan dengan benar atau disimpan terlalu lama sehingga menyebabkan beberapa komponen dalam kit tidak berfungsi.
Rekomendasi: Beli kit ekstraksi DNA genom tanaman baru untuk operasi terkait.
6. Penggunaan kit yang tidak tepat.
Saran: Beli Kit Isolasi DNA Tanaman yang didedikasikan untuk sampel untuk ekstraksi dan pemurnian DNA genom tanaman.
7. Buffer WB tanpa menambahkan anhidrat etanol.
Rekomendasi: Pastikan untuk menambahkan etanol absolut dengan volume yang benar ke Buffer WB.
8. Eluen tidak diteteskan ke membran silika dengan benar.
Saran: Tambahkan eluen yang telah dipanaskan sebelumnya pada suhu 65℃tetes demi tetes ke tengah membran silika gel, dan biarkan pada suhu kamar selama 5 menit untuk meningkatkan efisiensi elusi.
Ekstraksi untuk mendapatkan DNA genom hasil rendah
1. Sampel disimpan dengan tidak benar atau disimpan terlalu lama, mengakibatkan degradasi DNA genomik.
Rekomendasi: Simpan sampel jaringan pada -20℃;coba gunakan sampel jaringan yang baru dikumpulkan untuk ekstraksi DNA genomik.
2. Jika jumlah sampel jaringan terlalu sedikit, DNA genom yang diekstraksi akan lebih sedikit.
Saran: Beberapa sampel tanaman kaya akan air, seperti tanaman air seperti alga, dll., dosisnya dapat ditingkatkan dengan tepat atau airnya dapat didehidrasi sedikit sebelum operasi.
3. Sampel tidak digiling seluruhnya dengan nitrogen cair atau dibiarkan terlalu lama pada suhu kamar setelah digiling.
Saran: Penggilingan nitrogen cair harus cukup, dan dinding sel sampel harus dipecah sebanyak mungkin;segera setelah penggilingan, bubuk sampel harus dipindahkan ke 65℃Buffer PL1 yang telah dipanaskan sebelumnya untuk langkah selanjutnya.
4. Tidak menggunakan kit yang benar.
Rekomendasi: Gunakan Kit Isolasi DNA Tanaman khusus untuk mengekstrak dan memurnikan DNA genom tanaman.
5. Penyimpanan Foregene Protease yang tidak tepat menyebabkan aktivitas berkurang atau tidak aktif.
Rekomendasi: Pastikan kondisi penyimpanan Foregene Protease atau ganti dengan Foregene Protease baru untuk hidrolisis enzimatik.
6. Masalah eluen
Rekomendasi: Silakan gunakan Buffer EB untuk elusi;jika menggunakan ddH2O atau eluen lain, pastikan pH eluen antara 7,0-8,5.
7. Eluen tidak diteteskan dengan benar
Saran: Tambahkan tetesan elusi ke tengah membran silika dan biarkan pada suhu kamar selama 5 menit untuk meningkatkan efisiensi elusi.
8. Volume eluen terlalu kecil
Saran: Gunakan eluen untuk elusi DNA genomik sesuai petunjuk, minimal tidak kurang dari 100μl.
DNA genom yang diekstraksi dengan kemurnian rendah
Kemurnian DNA genomik yang rendah akan menyebabkan kegagalan atau efek buruk dari eksperimen hilir, seperti: enzim tidak dapat dipotong, dan fragmen gen target tidak dapat diperoleh dengan PCR.
1. Kontaminasi protein lain-lain, kontaminasi RNA.
Analisis: Buffer PW tidak digunakan untuk mencuci kolom;Buffer PW tidak digunakan untuk mencuci kolom pada kecepatan sentrifugasi yang benar.
Saran: usahakan agar tidak terjadi pengendapan pada supernatan saat supernatan dilewatkan melalui kolom;pastikan untuk mencuci kolom pemurnian dengan Buffer PW sesuai petunjuk, dan langkah ini tidak dapat diabaikan.
2. Polusi ion pengotor.
Analisis: Wash column Buffer WB dihilangkan atau hanya dicuci satu kali, mengakibatkan kontaminasi ion sisa.
Rekomendasi: Pastikan untuk mencuci dua kali dengan Buffer WB sesuai petunjuk untuk menghilangkan sisa ion sebanyak mungkin.
3. Kontaminasi RNase.
Analisis: RNase eksogen ditambahkan ke Buffer;operasi pencucian yang salah dalam Buffer PW akan menghasilkan sisa RNase dan memengaruhi operasi eksperimental RNA hilir, seperti transkripsi in vitro.
Saran: Kit ekstraksi asam nukleat seri foregene dapat menghilangkan RNA tanpa RNase tambahan, dan semua reagen dalam Kit Isolasi DNA Tanaman tidak memerlukan RNase;pastikan untuk mencuci kolom pemurnian dengan Buffer PW sesuai petunjuk, dan langkah ini tidak dapat diabaikan.
4. Residu etanol.
Analisis: Setelah kolom pemurnian dicuci dengan Buffer WB, tidak dilakukan sentrifugasi tabung kosong.
Rekomendasi: Ikuti petunjuk sentrifugasi tabung kosong yang benar.
Instruksi manual:
Instruksi Manual Kit Isolasi DNA Tanaman