• facebook
  • linkedin
  • Youtube

Membangun Sistem SOP

Menetapkan SOP percobaan PCR untuk menstandarkan perilaku petugas percobaan.

Empat cara pencegahan kontaminasi produk PCR1

Eksperimen secara ketat mematuhi prosedur operasi, dan meminimalkan polusi PCR yang mungkin disebabkan oleh faktor manusia atau mencegah terjadinya polusi dalam operasi.Selain itu, pelaku eksperimen harus memiliki pengetahuan dan keterampilan profesional yang sesuai, termasuk kemahiran dalam mengoperasikan peralatan terkait, mengklarifikasi seluruh proses kerja, menguasai metode pengolahan kontaminasi dan metode kontrol kualitas laboratorium, serta mampu menginterpretasikan hasil pengujian dengan benar.

Membangun Laboratorium PCR Standar

Empat cara pencegahan kontaminasi produk PCR2

Laboratorium PCR pada prinsipnya dibagi menjadi empat area, yaitu area persiapan reagen, area pemrosesan sampel, area amplifikasi, dan area analisis produk amplifikasi.Dua area pertama adalah area pra-amplifikasi, dan dua area terakhir adalah area pasca-amplifikasi.Zona pra-amplifikasi dan zona pasca-amplifikasi harus dipisahkan secara ketat.Bahan percobaan, reagen, kertas perekam, pulpen, bahan pembersih, dll. hanya dapat mengalir dari area pra-amplifikasi ke area pasca-amplifikasi, yaitu dari area persiapan reagen, area pemrosesan sampel, area amplifikasi, dan area analisis produk amplifikasi, dan tidak boleh mengalir ke arah sebaliknya.Aliran udara di laboratorium juga harus mengalir dari area pra-amplifikasi ke area pasca-amplifikasi, bukan sebaliknya.

Kurangi langkah-langkah percobaan

Jika laboratorium hanya melakukan deteksi dan identifikasi PCR, disarankan untuk menggunakan PCR kuantitatif fluoresen daripada PCR konvensional.

Empat cara pencegahan kontaminasi produk PCR3

Hasil deteksi PCR kuantitatif fluoresensi dapat dikumpulkan dan dianalisis oleh sinyal fluoresen, sehingga tidak perlu membuka tutup untuk elektroforesis setelah reaksi, yang menghindari kontaminasi produk PCR yang disebabkan oleh kebocoran produk reaksi untuk membentuk aerosol.Jika Anda menambah jumlah bukaan tutup selama langkah pemuatan elektroforesis gel, kemungkinan akan terjadi kontaminasi aerosol.Direkomendasikan untuk mempromosikan penerapan PCR kuantitatif dan mengganti PCR kualitatif secara bertahap.

Mengadopsi sistem anti polusi UNG

Sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG digunakan untuk reaksi PCR.

Sistem menggunakan dUTP, bukan dTTP.Setelah reaksi PCR, semua produk PCR (fragmen DNA) digabungkan dengan dUTP;pada putaran reaksi PCR berikutnya, enzim UNG yang ditambahkan ke dalam sistem diinkubasi pada suhu 37°C selama 5 menit sebelum PCR, yang dapat secara spesifik menurunkan semua fragmen DNA yang mengandung dUTP, kemudian melakukan reaksi PCR.Ini benar-benar dapat menghilangkan kontaminasi aerosol yang disebabkan oleh produk PCR.Efeknya ditunjukkan pada gambar di bawah ini:

Empat cara pencegahan kontaminasi produk PCR4Catatan: Untuk seri PCR langsung, Anda dapat memilih produk seri sistem polusi produk anti-PCR dari FJ Biotech

Menyarankan

Untuk laboratorium yang melakukan pengujian genotipe skala besar, sangat disarankan untuk menggunakan sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG untuk pengujian reagen selain pembangunan laboratorium yang wajar.

Peringatan: Penggunaan sistem ini tidak dapat menghilangkan kontaminasi produk PCR yang telah ditimbulkan.Oleh karena itu, sistem UNG harus digunakan pada awal pengujian yang relevan, dan sistem UNG harus selalu digunakan untuk amplifikasi PCR, untuk mencegah kontaminasi produk PCR.Positif palsu.

Disarankan untuk menggunakan sistem Direct PCR-UNG dari Forge Biotech saat melakukan pengujian skala besar, seperti: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;

Kit PCR Langsung Benih Tanaman-UNG;

Kit PCR Langsung Jaringan Hewan-UNG ;

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG。

Rangkaian kit dari Foregene ini tidak hanya dapat melakukan deteksi PCR dengan cepat dan dalam skala besar, tetapi juga secara efektif mencegah dan mengendalikan kontaminasi produk PCR.


Waktu posting: Jul-30-2021