W: Saudaraku, transkripsi balik selesai, dan akhirnya langkah terakhir – PCR kuantitatif fluoresen!Hei, saudara, apa itu PCR kuantitatif waktu nyata?
M:PCR Anda selalu tahu, kan?
W: Anda tahu, PCR adalah reaksi berantai polimerase, dan itu adalah teknologi yang meningkatkan DNA!
M: Hampir… Ini adalah metode teknis untuk memperkuat urutan target hingga lebih dari satu juta kali melalui primer tertentu, tetapi ini hanya menunjukkan ada atau tidaknya urutan target, dan tidak dapat menentukan jumlah templat awal.PCR kuantitatif fluoresensi adalah metode teknis yang dikembangkan untuk mengatasi masalah ini.PCR waktu nyata dan PCR kuantitas (qPCR) umumnya mengacu padanya.
W: Perbedaan dari PCR biasa terletak pada kuantifikasi fluoresensi?
M:Ya, yaitu, pada tahap perpanjangan setiap siklus PCR, intensitas sinyal fluoresensi terdeteksi, dan jumlah cetakan awal dapat dihitung sesuai dengan perubahan intensitas sinyal.
W:Rasanya sangat rumit!Apakah saya harus menghitung ini sendiri?
G: Ini mengharuskan Anda untuk belajar perlahan-lahan, yang terbaik adalah dapat memahami prinsipnya.Sekarang Anda dapat fokus pada nilai CT terlebih dahulu, yang merupakan data eksperimen yang relatif intuitif, dan ukurannya sesuai dengan ukuran jumlah templat awal.Ada juga grafik seperti kurva amplifikasi dan kurva leleh.Mereka memiliki keputusan akhir apakah eksperimen Anda berhasil atau tidak.
W: Oh, saudara.Lalu saya akan melakukan percobaan qPCR!
M: Berikan perhatian khusus untuk tidak menambahkan templat ke area reagen, jika tidak, campuran yang tidak terpakai akan mudah terkontaminasi!
W: Mengerti!

Real Time PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Efisiensi lebih tinggi, spesifisitas lebih besar
Sensitivitas tinggi, kompatibilitas yang baik