Perkenalan:

RNA, nama ilmiahnya asam ribonukleat, singkatannya berasal dari Asam RiboNukleat, adalah sejenis asam nukleat yang dibentuk dengan menghubungkan setidaknya puluhan ribonukleotida melalui ikatan fosfodiester.

Premis penjelajahan RNA adalah untuk mengekstraksi Total RNA bebas polusi, dan prinsip dasar ekstraksi RNA dapat diringkas secara kasar sebagai berikut:

1. Ganggu sel terlebih dahulu

2. Kemudian keluarkan pengotor makromolekul (protein, lipid, DNA, dll.)

3. Terakhir, RNA diendapkan sambil menghilangkan garam dan pelarut organik, dan selanjutnya memurnikan RNA

Dulu dan sekarang metode ekstraksi

Generasi pertama metode ekstraksi RNA adalah metode presipitasi TRIzol (reagen yang digunakan antara lain guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, dll.) ditemukan oleh seorang kakek bernama Piotr Chomczynski dan nenek Nicoletta Sacchi, karena penemuan ini memungkinkan ekstraksi RNA dengan cepat dan mudah, sejak saat itu dimulailah kebangkitan penelitian RNA.

Belakangan, Kakek menjual paten ini ke Invitrogen, dan Invitrogen mempromosikan metode ini ke dunia dan menjadi metode yang digunakan secara luas.

Belakangan, Invitrogen diakuisisi oleh Thermo!

Produk representatif: reagen TRIzol Invitrogen

Namun, metode pengendapan TRIzol memerlukan pengendapan berulang dan ekstraksi RNA, dan reagen yang digunakan beracun dan membutuhkan waktu lama untuk beroperasi.

Oleh karena itu, metode pemurnian kolom-enzim generasi kedua muncul, menggunakan membran gel silika sebagai bahan adsorpsi asam nukleat spesifik untuk memaksimalkan pemulihan RNA dalam sampel sambil menghilangkan pengotor lainnya.

Metode generasi kedua menyederhanakan operasi berdasarkan kinerja yang stabil, mengurangi faktor risiko, dan meningkatkan efisiensi ekstraksi RNA.

Produk representatif: QIAGEN RNeasy dan sebagian besar produk dalam negeri

Namun, baik metode generasi pertama maupun kedua membutuhkan penggunaan DNase untuk menghilangkan kontaminasi DNA, yang membawa beberapa ketidaknyamanan pada percobaan hilir berikutnya.Residu DNase akan mengurangi efisiensi transkripsi balik dan mengurangi sintesis cDNA untai pertama, sehingga mempengaruhi keakuratan hasil.

Oleh karena itu, metode ekstraksi generasi ketiga dioptimalkan berdasarkan generasi kedua.Eksperimen tidak perlu menambahkan enzim apa pun, dan RNA dapat diperoleh dengan mudah hanya dengan dua kolom.

Kolom 1: Kolom Pembersihan DNA untuk membersihkan DNA

Kolom 2: Hanya RNA Kolom khusus menyerap dan memulihkan RNA

Pengoperasian yang begitu sederhana tidak hanya menghemat waktu, tetapi juga memfasilitasi pengoperasian eksperimen hilir!

Produk perwakilan: QIAGEN RNeasy Plus danForegeneProduk seri pemurnian RNA

（RNeasy Plus）

（Foregene'sKit Isolasi RNA Total Tanaman）

Memberitahu Anda diam-diam!Kit RNA Foregene juga menghadirkan Penghapus RNase yang sangat mudah digunakan, yang dapat sepenuhnya menghilangkan 400μg RNase pada permukaan padat dalam 1 menit, tanpa menambahkan zat beracun apa pun ke tubuh manusia!

Gambar1: Bagan perbandingan proses operasional

Produk Foregene dapat menyelesaikan ekstraksi RNA hanya dalam dua lagu, jangan membuat orang lain iri dengan kemajuan eksperimen Anda!

Gambar2:Ehasil percobaan grafik perbandingan

Generasi pertama (1: TRIzol)

Generasi kedua (2: RNeasy dari QIAGEN)

Generasi ketiga (3: RNeasy plus QIAGEN, 4: Foregene)

Gambar3: grafik qPCR (grafik kurva amplifikasi)

Generasi pertama (hijau artinya TRIzol -, merah artinya TRIzol+)

Generasi kedua (langit biru berarti QIAGEN RNeasy-, merah berarti QIAGEN RNeasy +)

Generasi ketiga (biru berarti QIAGEN RNeasy plus, hijau berarti Foregene)

(Catatan: grafik qPCR “-” menunjukkan bahwa DNase belum ditambahkan dan kontaminasi DNA belum dihilangkan. Oleh karena itu, CT lebih tinggi dan hasilnya tidak akurat; “+” menunjukkan bahwa DNase telah ditambahkan dan kontaminasi DNA telah dihilangkan, hasilnya akurat)

Setiap peningkatan teknis berarti bahwa pengoperasian eksperimen berkembang ke arah yang lebih sederhana dan ramah pengguna.

Foregene bertujuan untuk membantu lebih banyak peneliti ilmiah menghemat waktu dan biaya eksperimen, mendapatkan hasil eksperimen berkualitas tinggi, dan bersama-sama menciptakan pencapaian penelitian ilmiah yang lebih berharga.