Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Dengan gDNase)(Super Premix untuk sintesis cDNA untai pertama dari lncRNA)
Spesifikasi
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Dengan gDNase) adalah sistem transkripsi terbalik yang dikembangkan khusus untuk lncRNA untuk menghilangkan kontaminasi DNA genom dengan cepat.5×gDNase Mix dapat dengan cepat menghapus genom yang tersisa di RNA pada suhu 42°C selama 2 menit, secara efektif menghindari gangguan genom pada hasil qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix berisi Foregene LncRNA Reverse Transcriptase yang dikembangkan secara khusus oleh Foregene, yang merupakan tipe baru reverse transcriptase khusus untuk lncRNA dan templat kompleks RNA panjang lainnya, dengan afinitas RNA yang lebih kuat dan efisiensi perekaman pembalikan yang lebih tinggi.Sistem yang dioptimalkan membuat tingkat transkripsi terbalik lebih cepat dan dapat dengan mudah menyalin template RNA dengan konten GC tinggi dan struktur sekunder yang kompleks.Sintesis cDNA untai pertama dapat diselesaikan pada suhu 42°C dalam 15 menit.
Komponen kit
| 5× Campuran gDNase |
| 5× Campuran L-RT HeroTM |
| ddH2O Bebas RNase |
| Instruksi |
Fitur & keuntungan
■Kemampuan yang efisien untuk menghapus gDNA, yang dapat menghapus gDNA di template dalam waktu 2 menit.
■ Dapat membalikkan transkripsi lncRNA secara efisien.Ketika produk transkripsi balik dikenai qPCR, nilai Ct lebih rendah daripada sistem transkripsi balik konvensional.
■ Sistem transkripsi balik yang efisien, hanya membutuhkan waktu 15 menit untuk menyelesaikan sintesis cDNA untai pertama.
■ Template kompleks: template dengan konten GC tinggi dan struktur sekunder yang kompleks juga dapat dibalik dengan efisiensi tinggi.
■ Sistem transkripsi balik sensitivitas tinggi, templat tingkat pg juga bisa mendapatkan cDNA berkualitas tinggi.
■ Sistem transkripsi terbalik memiliki stabilitas termal yang tinggi, suhu reaksi optimal adalah 42℃, dan masih memiliki kinerja transkripsi balik yang baik pada 50℃.
Aplikasi kit
analisis kuantitatif relatif lncRNA.
analisis kuantitatif mutlak lncRNA.
Itu dapat dengan cepat dan akurat menganalisis jejak RNA seperti virus RNA.
Membalikkan transkripsi template RNA dengan konten GC tinggi atau struktur sekunder yang kompleks.
Aliran kerja
Penyimpanan dan Umur simpan
Kit harus disimpan pada -20°C. Simpan produk dalam lemari es suhu konstan pada -20°C segera setelah diterima.Jika kondisi penyimpanan sesuai, produk tidak akan mengalami penurunan performa apapun selama masa berlaku 1 tahun.
Panduan Analisis Masalah
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplifikasi spesifik
1. Desain primer yang tidak masuk akal
Rekomendasi: Desain primer sesuai dengan prinsip desain primer.
2. Residu genom.
Saran: Pastikan suhu reaksi penghilangan gDNA tahap pertama adalah 42°C, dan waktu reaksi juga dapat diperpanjang hingga 5 menit.
Tidak ada sinyal amplifikasi oleh RT-qPCR
1. RNA terdegradasi.
Rekomendasi: Bahan untuk ekstraksi RNA harus sesegar mungkin, dan RNA berkualitas tinggi dan kemurnian tinggi harus digunakan.
2. RNA mengandung inhibitor.
Rekomendasi: Penghambat transkripsi terbalik umumnya termasuk SDS, garam guanidin, EDTA, dll. Disarankan untuk mencuci endapan RNA dengan etanol 70% untuk menghilangkan penghambat.
3. Masalah desain primer.
Rekomendasi: Menurut prinsip desain primer, desain ulang primer untuk pemeriksaan.
Pita target muncul di kontrol kosong
1. Kontaminasi alat atau reagen operasi.
Rekomendasi: Semua reagen atau peralatan untuk percobaan harus diautoklaf.Berhati-hatilah dan lembut saat memegang untuk mencegah sampel DNA tersedot ke dalam pipet atau tumpah keluar dari tabung sentrifus.
2. Kontaminasi terjadi selama persiapan sistem reaksi PCR.
Rekomendasi: Lakukan tindakan pencegahan yang diperlukan saat menangani, seperti: memakai sarung tangan lateks, menggunakan ujung filter.Gunakan Real Time PCR Mix dalam sistem anti kontaminasi.
3. Primer terdegradasi.
Saran: Gunakan elektroforesis SDS-PAGE untuk mendeteksi apakah primer terdegradasi, dan ganti dengan primer baru untuk eksperimen pendeteksian fluoresensi.
Instruksi manual:
